层析柱的规格
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。
交换
将试液加到交换柱上，用活塞控制一定的流速进行交换。
洗脱
当交换完毕之后，阴阳树脂柱生产厂家，一般用蒸馏水洗去残存溶液，然后用适当的洗脱液进行洗脱。在洗脱过程中、上层被交换的离子先被洗脱下来，经过下层未被交换的树脂时，又可以再度被交换。
阳离子交换树脂常采用HCl溶液作为洗脱液；阴离子交换树脂常采用NaCl或NaOH溶液作为洗脱液。洗脱之后的树脂已得到再生，用蒸馏水洗涤干净即可再次使用。
层析柱装柱步骤流程
1.计算每厘米柱床高度填料的数量；
2.选择合适的配件和末端筛网，选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料泄露；
3.选择装柱流速
首先：拍排泡
第二：调水平
第三：匀浆
第四：装柱
第五： 绘制压力/流速曲线，装柱流速为大流速的70%-****。
柱效检测
柱效主要取决于装柱质量。如果是离子交换或亲和层析填料，则不能使用有色物质，如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度（HETP）和对称因子As，使用NaCl或通过测定UV吸收或电导率进行计算。
使用NaCl溶液进行测定，优点样品是易得、安全，缺点是可能与填料发生反应，特别是离子交换树脂，阴阳树脂柱，因此影响测定结果。使用进行测定，阴阳树脂柱生产商，其不与层析填料发生反应，并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定，并且，测定缓冲液的浓度可提高至10倍。
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