层析柱装柱步骤流程
1.计算每厘米柱床高度填料的数量;
2.选择合适的配件和末端筛网,选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料泄露;
3.选择装柱流速
首先:拍排泡
第二:调水平
第三:匀浆
第四:装柱
第五: 绘制压力/流速曲线,装柱流速为大流速的70%-****。
柱效检测
柱效主要取决于装柱质量。如果是离子交换或亲和层析填料,则不能使用有色物质,如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度(HETP)和对称因子As,使用NaCl或通过测定UV吸收或电导率进行计算。
使用NaCl溶液进行测定,优点样品是易得、安全,缺点是可能与填料发生反应,特别是离子交换树脂,因此影响测定结果。使用进行测定,其不与层析填料发生反应,并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定,并且,测定缓冲液的浓度可提高至10倍。
硅胶柱层析和大孔树脂柱层的区别
硅胶柱层析和大孔树脂柱层析的区别?
大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂,树脂柱厂家供应,具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积,可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物即非极性或极性较弱的物质,具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点.树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力,通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作,黑龙江树脂柱厂家,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的.
硅胶柱的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程.其中有微孔,对不同化合物的吸附能力不同,然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离.
如遇停运期间恰为冬季或环境温度较低,为了防止树脂储存期间冻结,对树脂进行充分再生处理与水洗后,应用盐水进行过柱浸泡,树脂柱厂家现货,对树脂床层与树脂内部进行盐水置换保存,后期恢复运行之前,再用洁净的去离子水进行清洗置换。
盐水(或碱盐水)浸泡防止染菌
树脂长时间储存在树脂柱中存在藻类、细菌等微生物滋生的风险,为了有效抑制该问题的发生,可对树脂进行充分再生与清洗(使树脂保持清洁状态)后,树脂柱生产厂家,用10%的NaCl盐水或10%的NaCl 2%的NaOH碱盐水过柱浸泡置换处理后,将树脂保存在相应的盐水或碱盐水中,可有效抑菌。
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